中學(xué)的基因科技論文范文(2)
中學(xué)的基因科技論文范文
中學(xué)的基因科技論文范文篇二
卵巢癌的基因治療
【中圖分類號】R711 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-3783(2010)11-0077-02
卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的三大腫瘤之一，僅次于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌，但是因其早期無明顯臨床癥狀，致使等患者出現(xiàn)癥狀后再就醫(yī)往往為時(shí)已晚，所以其死亡率是婦科惡性腫瘤的首位。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展, 基因治療作為一種新的醫(yī)學(xué)技術(shù)得以迅速發(fā)展，為腫瘤的治療開創(chuàng)了新的領(lǐng)域。下面介紹幾種具有應(yīng)用前景的卵巢癌基因治療策略。
1 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡基因療法
誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡基因療法是一種通過選擇性表達(dá)或?qū)肽承┩庠椿蛘T導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,增強(qiáng)對化療的敏感性的有效基因療法。Survivin是最近新發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制基因,屬于凋亡抑制蛋白(inhibition apop tosis p rotein, IAP) 家族的新成員，所有分化成熟的組織中均檢測不到其表達(dá)，而大多數(shù)常見腫瘤組織內(nèi)如肺癌、胃癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌中表達(dá)異常升高[1]，其與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、血管生成、腫瘤的預(yù)后關(guān)系密切。
Wall等[2]應(yīng)用細(xì)胞分子生物學(xué)技術(shù)通過抑制Survivin基因蛋白的磷酸化過程來提高腫瘤細(xì)胞的凋亡率,從而達(dá)到治療腫瘤的目的。Survivin的多態(tài)序列中, 34位氨基酸為蘇氨酸,是細(xì)胞周期素依賴蛋白激酶P34cdc22的磷酸化點(diǎn),該位點(diǎn)的磷酸化對維持Survivin的凋亡抑制功能非常重要。以丙氨酸取代后的突變體(T34A)可以使凋亡抑制功能喪失,以此突變體轉(zhuǎn)染Hela癌細(xì)胞,突變體的高度表達(dá)可以誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的自發(fā)性凋亡。經(jīng)證實(shí),新一類的抗癌藥物GGTls中的GGTI-298 和GGTI-2166通過阻抑PBK/AKT和survivin途徑來誘導(dǎo)順鉑敏感和耐藥的人類卵巢上皮性癌細(xì)胞凋亡。在GGTI-298和GGTI-2166治療后, PBK和AKT激酶水平降低,生存素表達(dá)明顯減少。構(gòu)成上活化的AKT2和/或生存素的異位表達(dá)能明顯地復(fù)蘇被GGTI-298誘導(dǎo)凋亡的人類癌細(xì)胞。其前的研究顯示Akt調(diào)節(jié)生長因子誘導(dǎo)的生存素,而p53抑制生存素的表達(dá)。然而,構(gòu)成上活化的AKT2卻不能復(fù)蘇GGTIs下調(diào)生存素,再進(jìn)一步, GGTIs在野生型p53和p53不足的卵巢癌細(xì)胞株中均能抑制存活素的表達(dá)并誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡。這些資料表明GGTI-298和GGTI -2166不依賴于p53而針對PBK/AKT和survivin 類似途徑來誘導(dǎo)凋亡[3]。
2 抑制細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路療法
研究表明,表皮生長因子受體(EGFR)在許多惡性腫瘤中呈高表達(dá),并與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、預(yù)后等密切相關(guān)。Shih等在腦細(xì)胞瘤中發(fā)現(xiàn)了原癌基因neu，Padly等證實(shí)該癌基因編碼的185kDa的蛋白質(zhì)P185neu與EGFR的基因一樣同CerbB具有同源序列，故將EGFR基因命名為CerbB-1(HER-1)，neu基因命名為CerbB-2(HER-2)。近年來，又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了CerbB-3(HER-3)CerbB-4(HER-4)，組成了EGFR家族。此家族成員均是具有酪氨酸蛋白激酶活性(TPK)的生長因子受體。
CerbB-2的過度表達(dá)與卵巢癌患者生存期、生存率及卵巢癌的耐藥性的發(fā)生密切相關(guān)�[4]。Herceptin作為人源性單克隆抗體, 與CerbB-2 的細(xì)胞外部分有高度親和力, 能靶向結(jié)合于表達(dá)CerbB-2的卵巢癌細(xì)胞, 阻斷配體介導(dǎo)的細(xì)胞信號傳導(dǎo)，影響上皮細(xì)胞生長，也可通過誘導(dǎo)抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用殺傷腫瘤細(xì)胞。Mauricio等通過將Herceptin 與腫瘤壞死因子聯(lián)合應(yīng)用于陽性的CerbB-2卵巢癌細(xì)胞系,發(fā)現(xiàn)Herceptin能通過抑制酪氨酸激酶來增強(qiáng)腫瘤壞死因子引起的細(xì)胞凋亡效應(yīng)。臨床應(yīng)用Herceptin治療CerbB-2陽性卵巢癌已取得良好的治療效果。
3 多重耐藥基因療法
卵巢癌化療失敗的根本原因是產(chǎn)生化療藥物耐藥性。研究發(fā)現(xiàn), 在對順鉑、阿霉素耐藥的卵巢癌細(xì)胞株中72%的細(xì)胞出現(xiàn)了MDR1 基因的過度表達(dá)。抑制MDR1 基因的表達(dá), 不僅使細(xì)胞內(nèi)化療藥物濃度增加，也增強(qiáng)細(xì)胞對藥物的敏感性[5]。
卵巢癌多細(xì)胞球體多藥耐藥糖蛋白Pgp表達(dá)的升高與細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制劑p27呈正相關(guān)[6]。p27可使細(xì)胞周期蛋白E和細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶2的活性受到抑制，使細(xì)胞周期停滯在G1期，對細(xì)胞周期進(jìn)行負(fù)調(diào)控。Xing[7]將p27ASON經(jīng)脂質(zhì)體包裹轉(zhuǎn)染人卵巢癌細(xì)胞A2780、CAOV3，用錐蟲藍(lán)排除實(shí)驗(yàn)法和流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率來分別比較單層細(xì)胞p27ASON轉(zhuǎn)染前后培養(yǎng)的多細(xì)胞球體的紫杉醇敏感性，結(jié)果表明，p27ASON可以下調(diào)p27的表達(dá)，防止細(xì)胞間黏附并促進(jìn)細(xì)胞增殖而下調(diào)Pgp的表達(dá)，從而一定程度逆轉(zhuǎn)卵巢癌對紫杉醇化療的耐藥性。
4 突變補(bǔ)償療法
突變補(bǔ)償是消除主要致腫瘤基因,取代改變的腫瘤抑制基因,或干擾某些生長因子及其受體的功能。將特異性基因?qū)肽[瘤細(xì)胞,糾正腫瘤細(xì)胞的基因缺陷,使細(xì)胞周期停滯、誘導(dǎo)細(xì)胞程序性死亡或使腫瘤細(xì)胞對化療和放療敏感。編碼人類免疫缺陷腺病毒與野生型P53 (SCH58500)重組體腹膜注射有良好療效,既安全又可耐受,并且聯(lián)合鉑類化療在復(fù)發(fā)性卵巢癌患者有更好的效果。
目前研究最為深入的抑癌基因?yàn)镻53。在30%～79%卵巢癌中出現(xiàn)了P53異常。實(shí)驗(yàn)證明野生型P53基因轉(zhuǎn)染到有P53 基因突變的卵巢癌細(xì)胞,既抑制腫瘤的生長,又具有旁觀者效應(yīng)[2]。2005年Ad-P53基因治療獲準(zhǔn)進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)，現(xiàn)我國重組人P53腺病毒(今又生)廣泛應(yīng)用于臨床卵巢癌的治療并取得了良好的治療效果。
5 反義基因療法
它是利用反義技術(shù)設(shè)計(jì)與異常激活有害基因及其mRNA互補(bǔ)的反義寡核苷酸,特異性封閉這些基因使其不表達(dá)或低表達(dá),從而達(dá)到減少基因產(chǎn)物,抑制細(xì)胞惡變的作用。由于該療法是從核酸角度著眼,故而是一種最根本、最有前途的治療方法。Fei R[8]針對CerbB-2基因和c-myc基因,聯(lián)合抗基因治療,靶向CerbB-2和c-myc,抑制卵巢癌細(xì)胞COC(1)細(xì)胞增殖和CerbB-2及c-myc基因表達(dá)。c-raf-1可被ras基因激活之外還存在獨(dú)立的激活途徑:可被酪氨酸激酶src與JAK1、蛋白激酶Cα、神經(jīng)酰胺活化的蛋白激酶等激活。因而c-raf-1是EGFR介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)上的關(guān)系基因之一[9],c-raf-1是理想的基因治療靶點(diǎn)。CerbB-2 ASODN 與CerbB-2 mRNA 5’端編碼區(qū)互補(bǔ),Craf-1 ASODN 與Craf-1 mRNA 3’端非編碼區(qū)互補(bǔ)。Pirollo等針對raf-1、H-ras、CerbB-2基因設(shè)計(jì)合成的硫代ASO,不僅能抑制卵巢癌細(xì)胞生長,而且能增加對放療的敏感性。
Zaffaroni等[10]在體外和體內(nèi)的研究中利用針對Survivin的反義寡苷酸治療腫瘤,發(fā)現(xiàn)腫瘤的生長速度減慢,并且可以提高腫瘤細(xì)胞對化療藥物的敏感性,如紫杉醇、順鉑和鬼臼乙叉甙及對照射和免疫治療的敏感性。研究表明靶向抑制survivin基因表達(dá)在腫瘤治療中有巨大的潛在價(jià)值。
等針對端粒酶hTERT設(shè)計(jì)合成反義脫氧寡核苷酸,對卵巢癌細(xì)胞系SKOV3及ES-2進(jìn)行反義基因治療,能通過抑制端粒酶活性,增強(qiáng)細(xì)胞周期阻滯及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等抑制卵巢癌細(xì)胞生長,與CDDP合用能增強(qiáng)對癌細(xì)胞的殺傷作用。
基因治療為卵巢癌的治療展現(xiàn)了一個(gè)極有希望的前景。學(xué)者們正針對卵巢癌的基因治療中存在的一些問題,研究載體改良,增強(qiáng)目的基因靶向性等,迎接根治卵巢癌的挑戰(zhàn)。相信隨著人類基因組計(jì)劃的完成,分子生物學(xué)等學(xué)科的進(jìn)一步深入發(fā)展,人類將開辟卵巢癌基因治療的新紀(jì)元。
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作者單位：215123 蘇州工業(yè)園區(qū)婁葑醫(yī)院婦產(chǎn)科(江蘇 蘇州)
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