培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要，添加一些自身無法合成的化合物，即生長因子。有些微生物，如自養(yǎng)型微生物，不需要碳源，所以上述物質(zhì)只具有一般性。以下是學(xué)習(xí)啦小編今天為大家精心準(zhǔn)備的：蛹蟲草母種培養(yǎng)基配方優(yōu)化的研究相關(guān)論文。內(nèi)容僅供參考，歡迎閱讀!

　　蛹蟲草母種培養(yǎng)基配方優(yōu)化的研究全文如下：

　　蛹蟲草[Cordyceps militaris (L.)Link.]又稱北冬蟲夏草,北蟲草,與冬蟲夏草同屬異種,隸屬真菌門、子囊菌亞門、核菌綱、麥角菌科、蟲草屬,是蛹蟲草真菌寄生在鱗翅目夜蛾科昆蟲蛹體上形成的子座與蛹體的結(jié)合體[1-2]。蛹蟲草是著名的食藥用菌,具有較高藥用價(jià)值,具有補(bǔ)肺益腎、抗疲勞、抗腫瘤、抗衰老、美容養(yǎng)顏等保健作用,以及顯著增強(qiáng)免疫力的功能[3-4]。其菌體內(nèi)蛋白質(zhì)含量高達(dá)40%以上,氨基酸種類齊全(其中含有人體必須的8種氨基酸),并含有鋅、銅、硒等多種微量元素,其維生素不但種類多,且含量極為豐富。蟲草屬真菌的深層培養(yǎng),主要目的是大批量生產(chǎn)菌絲體,并從培養(yǎng)液中提取蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、甘露醇、SOD等多種有效成分[5-6]。經(jīng)中國中醫(yī)研究所等權(quán)威機(jī)構(gòu)檢測發(fā)現(xiàn),蛹蟲草中各種有效成分的含量均接近甚至超過冬蟲夏草。近年來,人們把人工培育的蛹蟲草作為冬蟲夏草的替代品,以替代天然冬蟲夏草的不足。研究表明,蛹蟲草的菌絲體和子實(shí)體具有基本相同的有效成分及藥用與滋補(bǔ)功效。

　　蛹蟲草母種培養(yǎng)基的研究已有一些報(bào)道,但所述培養(yǎng)基各有不同,產(chǎn)量與品質(zhì)也高低不一,這種情況嚴(yán)重影響其產(chǎn)業(yè)發(fā)展。在蛹蟲草的母種培養(yǎng)中,培養(yǎng)基的配方是否優(yōu)良,直接影響菌絲體的生長。因此,對(duì)蛹蟲草母種培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化研究,篩選出適合蛹蟲草菌絲體生長的最佳母種配方具有一定的理論與實(shí)際意義。本試驗(yàn)以不同的研究人員試驗(yàn)獲得的6種母種培養(yǎng)基為基礎(chǔ),以菌種初萌發(fā)時(shí)間、菌絲長速、菌絲長勢(shì)、滿管時(shí)間為指標(biāo),篩選出母種培養(yǎng)基的最佳配方,以期應(yīng)用于蛹蟲草的生產(chǎn)和科學(xué)研究。 [論文網(wǎng)]

　　材料和方法：

　　1.1 菌 種

　　蛹蟲草試管母種由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物教研室提供。

　　1.2 主要儀器

　　不銹鋼立式壓力蒸汽滅菌器,上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn),型號(hào):LDZX-30FB;超凈工作臺(tái),蘇凈集團(tuán)安泰公司制造,型號(hào):SW-CJIFD;恒溫培養(yǎng)振蕩器,天津市歐諾儀器儀表有限公司生產(chǎn),型號(hào):HNY-2102。

　　1.3 培養(yǎng)基設(shè)計(jì)

　　根據(jù)蛹蟲草生長所需營養(yǎng)條件及不同研究人員提供的最佳配方確定。

　　1.3.1 配方1 葡萄糖10 g、蛋白胨10 g、瓊脂20 g、MgSO4 0.3 g、KH2PO4 0.5g 、VB1(50 mg·L-1)、蒸餾水1 L、pH值5~6。

　　1.3.2 配方2 葡萄糖10 g、牛肉膏10 g、瓊脂25 g、MgSO4 0.6 g、KH2PO4 2 g、乙酸鈉5 g、檸檬酸二胺2 g、MnSO4 0.25 g、吐溫80 mL、酵母粉5 g或酵母膏10 g、蒸餾水1 L、pH值6.2~6.4。

　　1.3.3 配方3 蛋白胨10 g、牛肉膏3 g、瓊脂17 g、NaCl 5 g、蒸餾水1 L、pH值7.2左右。

　　1.3.4 配方4 葡萄糖10 g、瓊脂20 g、MgSO4 1 g、KH2PO4 1.5 g、VB1(50 mg·L-1)、CaCO3 1 g、蒸餾水1 L、pH值5~6。

　　1.3.5 配方5 葡萄糖15 g、檸檬酸銨 2.5 g、瓊脂20 g、乙酸鈉5.5 g、MgSO4 0.65 g、MnSO4 0.3 g、KH2PO4 1.5 g、蒸餾水1 L、pH值自然。

　　1.3.6 配方6 20%馬鈴薯提取液中加入1%葡萄糖、1%蛋白胨、2%瓊脂、0.5%KH2PO4、0.3%MgSO4、VB1(10 mg·L-1)、蒸餾水1 L、pH值5.8。

　　1.4 方法步驟

　　1.4.1 培養(yǎng)基制備、分裝與滅菌 按培養(yǎng)基制備的常規(guī)技術(shù),分別制作以上6種配方培養(yǎng)基。配方中有馬鈴薯者,將馬鈴薯削皮、去掉芽眼切塊(0.5 cm×1 cm),稱質(zhì)量。置沸水中煮30 min,用4層紗布過濾擠壓取其汁液至于燒杯中,同時(shí)加入瓊脂及其它藥品攪拌使其充分溶解,加水定容至1 L,測定并調(diào)整酸堿度。將制備的培養(yǎng)基分別裝入試管中,裝量為管高的1/4。每種配方裝6支試管,塞上棉塞封口,捆扎。在壓強(qiáng)1.14×105 MPa、溫度120 ℃下高壓滅菌30 min后,待高壓鍋的氣壓降至0,將試管取出冷卻并擱置斜面,然后將其放入28~30 ℃室溫中培養(yǎng)48 h進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。檢查完畢將其置于超凈工作臺(tái)中備用。

　　1.4.2 接種與培養(yǎng) 接種前將母種菌株擱置在恒溫箱中活化1 d,然后菌種移入接種室,在超凈工作臺(tái)中按無菌操作要求,向試管斜面中央接種,接種塊大小為5 mm×25 mm。注意接種塊不要碰到其它部位,以免影響菌種萌發(fā)后菌絲體的觀察。每種培養(yǎng)基配方接6支試管。接種后移入恒溫箱中培養(yǎng),培養(yǎng)條件為18.5~19 ℃,無光照。接種后每2 d記錄菌落形成及菌絲生長情況。

　　1.4.3 測定菌絲長速 菌絲長速是菌絲生長的指標(biāo)。將菌絲接種到斜面培養(yǎng)基中,每天測量1次菌落直徑,直至菌落滿管為止。觀察并記錄每種配方6支試管中菌絲的生長情況,重復(fù)3次取其平均值。

　　1.4.4 統(tǒng)計(jì)滿管天數(shù) 滿管天數(shù)是菌種接種到斜面培養(yǎng)基上,到菌絲布滿斜面所需要的時(shí)間。觀察并記錄每種配方6支試管的滿管時(shí)間,重復(fù)3次取其平均值。

　　1.4.5 觀察菌種初萌發(fā)天數(shù) 從菌種接種到培養(yǎng)基上開始觀察,到接種塊周圍長出白色絨毛狀菌絲體,這段時(shí)間為菌種初萌發(fā)時(shí)間。從接種開始,每24 h觀察并記錄每種配方6支試管中菌種的萌發(fā)情況,重復(fù)3次取其平均值。

　　1.4.6 觀察菌絲長勢(shì) 菌絲長勢(shì)是評(píng)價(jià)菌絲生長情況的重要指標(biāo)。以菌絲的潔白程度、生長健壯程度、菌絲濃密程度、菌臺(tái)厚度為指標(biāo),觀察并記錄每種配方6支試管中菌絲的長勢(shì)。觀察結(jié)果用很強(qiáng)、強(qiáng)、較強(qiáng)、弱4個(gè)等級(jí)表示。