高中生物選修知識點總結(jié)：細胞工程

　　(一)植物細胞工程

　　1. 理論基礎(chǔ)(原理)：細胞全能性

　　全能性表達的難易程度：受精卵>生殖細胞>干細胞>體細胞;植物細胞>動物細胞

　　2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)

　　(1)過程：離體的植物器官、組織或細胞→愈傷組織→試管苗→植物體

　　(2)用途：微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

　　(3)地位：是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。

　　(二)動物細胞工程

　　1. 動物細胞培養(yǎng)

　　(1)概念：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。

　　(2)動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組

　　織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

　　(3)細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。

　　(4)動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件

　　①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

　　②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。

　　③溫度：適宜溫度：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH：7.2～7.4。

　?、軞怏w環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

　　(5)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學研究的各種細胞。

　　2. 動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物

　　(1)哺乳動物核移植可以分為胚胎細胞核移植(比較容易)和體細胞核移植(比較難)。

　　(2)選用去核卵(母)細胞的原因：卵(母)細胞比較大，容易操作;卵(母)細胞細胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富。卵細胞的細胞質(zhì)可使體細胞細胞核全能性得到表達。

　　高中生物選修知識點總結(jié)：基因工程

　　基因工程：是指按照人們的愿望，進行嚴格的設(shè)計，通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?；蚬こ淌窃贒NA分子水平上進行設(shè)計和施工的，又叫做DNA重組技術(shù)。

　　(一)基因工程的基本工具

　　1. “分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)

　　(1)來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。

　　(2)功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。

　　(3)結(jié)果：

　　經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。

　　2. “分子縫合針”——DNA連接酶

　　(1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較：

　?、傧嗤c：都縫合磷酸二酯鍵。

　?、趨^(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。