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高二下冊(cè)生物菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程

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  高二下冊(cè)生物菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程

  一、制備MS固體培養(yǎng)基

  實(shí)驗(yàn)室一般使用4℃保存的配制好的培養(yǎng)基母液來(lái)制備

  1、配制各種母液。

  配制母液時(shí),大量元素濃縮 ,微量元素濃縮 。常溫保存。激素類(lèi)、維生素類(lèi)以及用量比較小的有機(jī)物可以按照1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制母液。用母液配制培養(yǎng)基時(shí),需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù),計(jì)算用量。

  2、配制培養(yǎng)基。

  配制1LMS培養(yǎng)基時(shí),先將稱(chēng)量好的瓊脂加入800mL蒸餾水,加熱使瓊脂熔化,然后加入蔗糖30g,去配制好的母液,依次加入,然后定容至1000mL。調(diào)節(jié)pH值,然后分裝到錐形瓶中,每瓶分裝50或100mL

  3、滅菌。高壓蒸汽滅菌

  二、外植體消毒

  選取菊花莖段時(shí),要取 。

  無(wú)菌技術(shù)包括培養(yǎng)基消毒滅菌和植物材料(外植體)的消毒滅菌。對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí),一方面要考慮_______________;另一方面還要考慮植物材料的__________。不同藥劑、不同植物材料,甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。一般情況下,細(xì)菌污染可能是由接種人員造成的,真菌污染可能是_________滅菌不當(dāng)。

  三、接種

  接種前,用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精將工作臺(tái)擦拭,然后點(diǎn)燃酒精燈。所有的接種操作必須在酒精燈旁進(jìn)行,并且每次使用器械后,都要用火焰灼燒滅菌

  四、培養(yǎng)

  接種后的錐形瓶最好放在無(wú)菌箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期消毒,溫度控制在18-22℃,并且每天用日光燈光照12h

  五、移栽

  移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜,讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日,然后用清水清洗根部的培養(yǎng)基,將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或者珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間,等幼苗長(zhǎng)壯后再移栽到土壤中

  六、栽培

  每天要觀察記錄幼苗的生長(zhǎng)情況,適時(shí)澆水、施肥,直至開(kāi)花

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