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　　高二下冊生物菊花的組織培養(yǎng)實驗操作過程

　　一、制備MS固體培養(yǎng)基

　　實驗室一般使用4℃保存的配制好的培養(yǎng)基母液來制備

　　1、配制各種母液。

　　配制母液時，大量元素濃縮 ，微量元素濃縮 。常溫保存。激素類、維生素類以及用量比較小的有機物可以按照1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨配制母液。用母液配制培養(yǎng)基時，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量。

　　2、配制培養(yǎng)基。

　　配制1LMS培養(yǎng)基時，先將稱量好的瓊脂加入800mL蒸餾水，加熱使瓊脂熔化，然后加入蔗糖30g,去配制好的母液，依次加入，然后定容至1000mL。調(diào)節(jié)pH值，然后分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50或100mL

　　3、滅菌。高壓蒸汽滅菌

　　二、外植體消毒

　　選取菊花莖段時，要取 。

　　無菌技術(shù)包括培養(yǎng)基消毒滅菌和植物材料(外植體)的消毒滅菌。對培養(yǎng)材料進行表面滅菌時，一方面要考慮_______________;另一方面還要考慮植物材料的__________。不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對待。一般情況下，細菌污染可能是由接種人員造成的，真菌污染可能是_________滅菌不當(dāng)。

　　三、接種

　　接種前，用體積分數(shù)70%的酒精將工作臺擦拭，然后點燃酒精燈。所有的接種操作必須在酒精燈旁進行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼燒滅菌

　　四、培養(yǎng)

　　接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間定期消毒，溫度控制在18-22℃，并且每天用日光燈光照12h

　　五、移栽

　　移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日，然后用清水清洗根部的培養(yǎng)基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或者珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中

　　六、栽培

　　每天要觀察記錄幼苗的生長情況，適時澆水、施肥，直至開花

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