高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)
“葉綠體中色素的提取和分離”是高中生物教材中的一個(gè)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn),有哪些知識(shí)點(diǎn)需要掌握?下面是學(xué)習(xí)啦小編給大家?guī)?lái)的高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn),希望對(duì)你有幫助。
高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)
1、原理:(1)葉綠體中的色素能溶解在有機(jī)溶劑無(wú)水乙醇(或丙酮)中,所以用無(wú)水乙醇可提取葉綠體中的色素。(2)不同的色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散得慢,因而可用層析液將不同色素分離。
3、結(jié)果分析:①?gòu)纳貛У膶挾瓤芍睾康亩嗌僖来螢椋喝~綠素a>葉綠素b>葉黃素>胡蘿卜素; ②從色素帶的位置可知色素在層析夜中溶解度大小依次是:胡蘿卜素>葉黃素>葉綠素a>葉綠素b; ③在濾紙上距離最近的兩條色素帶是葉綠素a 與葉綠素b ,距離最遠(yuǎn)的兩條色素帶是胡蘿卜素與葉黃素。
4、注意事項(xiàng):(1)裁取定性濾紙時(shí),注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。 (2)根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長(zhǎng)度高出燒杯1cm ,高出的部分做直角彎折。
(3)畫(huà)濾液細(xì)線時(shí),用力要均勻,速度要適中。
(4)研磨要迅速、充分。a.因?yàn)楸菀讚]發(fā);b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;
c.葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而被破壞。
(5)制備濾紙條時(shí),要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻,便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
5、實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新:在本實(shí)驗(yàn)中在圓形濾紙中央點(diǎn)上葉綠體色素的提取液進(jìn)行層析,會(huì)得到近似同心的四個(gè)色素環(huán),由內(nèi)到外依次是黃綠色、藍(lán)綠色、黃色、橙黃色。
高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題
一、 為什么要選新鮮綠色的幼嫩葉片?
因?yàn)槿~綠色含N﹑Mg,而老葉中這兩種礦質(zhì)元素很多已經(jīng)分解轉(zhuǎn)移,所以鮮綠色的幼葉中葉綠素的含量高,適合于實(shí)驗(yàn).
二、 制備濾紙條要剪去兩角
實(shí)驗(yàn)中需將濾紙條的一端剪去兩角,為什么這樣做,如果不會(huì)怎么樣呢? 原來(lái)若不剪去濾紙條的兩角,色素帶的兩邊和中間不是在一條直線上。這是由于濾紙條兩邊水分子可以向三個(gè)方向散失,向上“跑”的速度快。而濾紙條中間的水分子只能向兩個(gè)方向散失,分別是向內(nèi)和向外,因而會(huì)“跑”得慢一些。而現(xiàn)在剪去濾紙條的兩個(gè)角,可以在一定程度上加快中間色素的擴(kuò)散速 度,減慢兩邊色素的擴(kuò)散速度,從而真正意義上使這些色素從同一起點(diǎn)隨層析液擴(kuò)散.
三、為什么研磨時(shí)加無(wú)水乙醇或丙酮?
因?yàn)樯厥怯袡C(jī)物,根據(jù)相似相容性原理,無(wú)水乙醇或丙酮能溶解色素
四、為什么加入少許二氧化硅?
在提取色素的過(guò)程中,要加人少許二氧化硅。原來(lái)是為了研磨得充分。二氧化硅就是石英沙子,研磨時(shí)可以增大強(qiáng)度,加快細(xì)胞和葉綠體的破裂,而使葉綠體中的色素釋放出來(lái)。
五、為什么加入少許碳酸鈣?
在提取色素的過(guò)程中,要加人少許碳酸鈣。原來(lái)是為了防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受到破壞。葉綠體中的色素原本所處的環(huán)境具微堿性。在實(shí)驗(yàn)中,研磨會(huì)使細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到破壞,細(xì)胞液中有機(jī)酸流出,酸性的細(xì)胞液就會(huì)接觸到葉綠體中的色素,致使葉綠素的分子結(jié)構(gòu)遭到破壞,使葉綠素失鎂,呈黃褐色,如同我們看到到腌制的黃瓜會(huì)變色一樣,而碳酸鈣是強(qiáng)堿弱酸鹽,碳酸鈣在水中的溶解度很小,但還是有一部分得到溶解,中和細(xì)胞液的酸性,制造了一個(gè)弱堿環(huán)境,保護(hù)了色素。
六、為什么用單層尼龍布過(guò)濾?
在過(guò)濾時(shí),漏斗基部放一塊單層尼龍布,老教材中是用濾紙來(lái)過(guò)濾的。過(guò)濾的目的是去掉不需要的雜質(zhì)如破碎的細(xì)胞、二氧化硅、碳酸鈣等,相對(duì)而言,單層尼龍布可以讓色素溶液更好地通過(guò)效果比濾紙要好。
高中生物必修1實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)
1、還原糖的檢測(cè)
(1)材料的選?。哼€原糖含量高,白色或近于白色,如蘋(píng)果,梨,白蘿卜。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍(lán)色→磚紅色)
★模擬尿糖的檢測(cè)
1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液
2、檢測(cè)方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙
3、結(jié)果:(用斐林試劑檢測(cè))試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。
4、分析:因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原糖,與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀,而正常人尿液中無(wú)還原糖,所以沒(méi)有發(fā)生反應(yīng)。
2、脂肪的檢測(cè)
(1)材料的選取:含脂肪量越高的組織越好,如花生的子葉。
(2)步驟: 制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
制作裝片(滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)
鏡檢鑒定(顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)
(1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)
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